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    重組蛋白真核表達系統與原核表達系統的區別

  • 發(fā)布日期:2021-10-14      瀏覽次數:1976
    •   重組蛋白真核表達系統與原核表達系統的區別
        重組蛋白真核表達采用原核表達系統進(jìn)行研究,主要方法是將已克隆到目的基因DNA的片段的載體轉化到細菌中,通過(guò)IPTG誘導和終純化獲得所需的目的蛋白。其優(yōu)點(diǎn)是可以在短時(shí)間內獲得基因表達產(chǎn)物,所需成本相對較低。
        目前的表達系統各有利弊,但一般理想的表達系統滿(mǎn)足以下幾點(diǎn):一是特異性,不受其他內源性因素影響,只能通過(guò)外源性無(wú)毒物激活。二是不干擾,不干擾細胞通路。以及誘導劑的誘導性、生物利用度、可塑性和劑量依賴(lài)性。
        因此,在選擇表達系統時(shí),必須充分考慮各種因素,如蛋白質(zhì)性質(zhì)、實(shí)驗條件、生產(chǎn)成本、表達水平和安全性。權衡利弊后,選擇相應的表達系統。
        原核表達系統與重組蛋白真核表達系統的區別:
        1.根本的區別是,原核表達系統的表達系統是原核細胞;真核表達系統在真核細胞如酵母細胞、昆蟲(chóng)細胞和哺乳動(dòng)物細胞中表達。
        2.兩種表達系統都通過(guò)含有原核或真核啟動(dòng)子和其他表達相關(guān)元件的質(zhì)粒系統表達外源基因。
        3.與真核表達系統相比,原核表達系統的表達效率易于優(yōu)化和調整,表達量高。然而,當用于表達真核外源基因時(shí),由于不同的蛋白質(zhì)折疊和糖鏈修飾,其應用受到限制。真核表達系統的表達量相對較低。雖然酵母和昆蟲(chóng)系統的表達量相對較高,但哺乳動(dòng)物基因的表達也存在不足。

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